細胞制備：新藥開發(fā)中細胞擴增和污染控制
細胞制備是藥物開發(fā)高效和一致性的重要基礎(chǔ)和初始環(huán)節(jié)。大規(guī)模細胞培養(yǎng)，以及擴大培養(yǎng)中的細胞傳代，其中一大核心技術(shù)便是污染的控制。賽多利斯創(chuàng)新的細胞傳代解決方案，助您切實消除污染，簡化工藝流程并提升效率。
為加速藥物開發(fā)進程，我們優(yōu)化的產(chǎn)品組合可提高生產(chǎn)力，確保您選擇合適的候選化合物，并縮短進入臨床試驗的時間。
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控制污染，以免導(dǎo)致藥物開發(fā)項目終止
污染源可能是細菌、酵母、霉菌、化學(xué)物質(zhì)、其它生物制劑和/或細胞系交叉污染。它會影響細胞的生長、形態(tài)和行為，從而延緩您的項目進度。對任何涉及細胞培養(yǎng)的項目來說，污染是其面對的一大主要挑戰(zhàn)。
細菌污染
細菌是最常見的污染物。通常，自來水的細菌污染物含量是100-1000 CFU/100 mL，但美國材料與試驗協(xié)會（ASTM International）設(shè)定的標準是，在細胞培養(yǎng)時細菌污染物含量<10 CFU/100 mL。與其它污染物不同，細菌污染通常很容易檢測到，因為培養(yǎng)物會不清澈或變混濁，且/或培養(yǎng)基的顏色會發(fā)生變化，提示pH值下降。細菌在顯微鏡下也很容易看見。
盡管很容易檢測到大多數(shù)細菌污染，但它仍然會降低您的效率，畢竟您未必會第一時間注意到污染，可能還準備使用該培養(yǎng)物進行后續(xù)的化驗分析。另外，去污也是成本高昂且很耗時的。
為了避免受到細菌污染：
- 水是您最重要的試劑，所以請務(wù)必使用新生成的超純水
- 悉心看管您的其它試劑，進行無菌過濾以消除任何污染的可能性
- 盡可能采用無菌技術(shù)，且僅使用無菌試劑
- 留意一般實驗室?guī)齑?，對其進行污染監(jiān)測往往是一大挑戰(zhàn)?
助您免受細菌污染的工具：
支原體污染
支原體污染很難以防范，因為具有柔性細胞膜的支原體較?。?.15 μm-0.3 μm），且無細胞壁，因此很難通過顯微鏡檢測到。此外由于支原體尺寸較小，即使在哺乳動物細胞培養(yǎng)物內(nèi)增殖到較高濃度，細胞培養(yǎng)物表面也看不到任何明顯渾濁跡象或其它變化。
在細胞系消失前，支原體對培養(yǎng)物的污染可能并不明顯。
已污染細胞的交叉污染是支原體污染的主要來源之一。消除培養(yǎng)物中的支原體污染幾乎不可能；它對大多數(shù)抗生素有抵抗力，可以在未經(jīng)凍存技術(shù)處理的液氮中存活，污染儲存在同一液氮杜瓦瓶中的其它細胞。
在細胞培養(yǎng)時使用特異的支原體檢測可以提高您的效率，便于您即刻了解細胞是否受到污染，以免浪費時間、試劑和精力。使用無支原體的培養(yǎng)物可以增大您的實驗結(jié)果轉(zhuǎn)化為臨床的幾率。
細胞傳代
無論是貼壁細胞或非貼壁細胞，所有細胞在細胞擴增期間最終都需要進行傳代或繼代培養(yǎng)。然而傳代會帶來污染風險，因為需要打開培養(yǎng)瓶對細胞進行操作，并補充新的培養(yǎng)基和添加劑。所有這些步驟都會增大引入污染物的幾率。采用適當?shù)臒o菌技術(shù)、快速操作，并使用最佳工具和未污染試劑，有助于降低在細胞培養(yǎng)中引入污染物的風險。
有助于減少培養(yǎng)物中污染物的工具：
在生物安全柜外進行細胞傳代：既避免引入污染物并提高效率
采用我們創(chuàng)新性細胞擴增系統(tǒng)，您無需打開燒瓶或在層流罩內(nèi)，即可無菌傳代細胞。為防止在生物安全柜外傳代期間發(fā)生污染，該系統(tǒng)組合采用了無菌液體轉(zhuǎn)移管路和在預(yù)裝配于塑料錐形搖瓶的蓋子中進行氣體交換的濾芯。
我們的MYCAP CCX系統(tǒng)和傳統(tǒng)錐形燒瓶中的細胞生長率基本相同。通過使用接管機或無菌連接器，在生物安全柜外可以完成燒瓶內(nèi)的培養(yǎng)基灌裝、接種、取樣和轉(zhuǎn)移這些無菌操作。
這些功能可以讓您降低污染風險，無需使用備份燒瓶即可提高效率，同時減少多余的傳代工作。此外，您還無需使用生物安全柜，從而降低運作成本并簡化操作。
提高液體處理的效率，減少凍存時的細胞損失
細胞系是您最寶貴的資源之一，但同時，它們也很脆弱。持續(xù)培養(yǎng)的細胞系可能因細胞群的衰老、污染和/或遺傳漂移而有所損失。在液氮中凍存可以保護細胞系。然而，冷凍和融解的工藝流程會給這些脆弱的細胞帶來壓力。儲存于液氮中的細胞往往通過使用冷凍保護劑，如二甲亞砜（DMSO）或甘油而受到保護，免受損害影響?？焖俨僮鞑⑹褂昧己玫募夹g(shù)對降低寶貴細胞被破壞的可能性也至關(guān)重要。
正確的工具可以幫您快速、高效操作，而錯誤的工具會拖慢您的速度，并增加額外的工序。
您選擇的移液器和移液器吸頭對從種子和所建細胞系的工作庫存中移取細胞都有影響。與水溶液的細胞培養(yǎng)基相比，含冷凍保護劑的溶液的表面張力更低。例如，最常用于防冷凍的DMSO在20℃時的表面張力約為43 mN/m（而水為73 mN/m）。表面張力低，意味著液體會在移液器吸頭內(nèi)表面形成液膜，難以精確移液。使用合適的移液器吸頭，如采用拋光處理表面的低吸附吸頭，可為您確保細胞懸液中的冷凍保護劑達到正確比例，從而降低冷凍和融解期間破壞細胞的可能性。
