該測(cè)定試劑盒專(zhuān)為定量分析細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活力而設(shè)計(jì)，其經(jīng)過(guò)優(yōu)化，可在采用 BR 和 VBR 配置的 iQue^? 平臺(tái)上運(yùn)行，并且與高通量采樣和流式細(xì)胞儀檢測(cè)功能相結(jié)合。其利用從細(xì)胞標(biāo)記到分析的簡(jiǎn)化的工作流程，能夠在寬線性范圍內(nèi)對(duì)各種非貼壁細(xì)胞系的絕對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活力進(jìn)行快速分析。

該試劑盒中包含經(jīng)驗(yàn)證的試劑和預(yù)置模板，用于設(shè)門(mén)策略和分析。其使用客戶(hù)提供的細(xì)胞，在快速、無(wú)需洗滌的分析中鑒別活細(xì)胞并測(cè)定樣品密度。

基本的分析工作流程：

• 將未稀釋的細(xì)胞與細(xì)胞活力染料以 1:1 的比例混合并孵育 10-30 分鐘
• 將計(jì)數(shù)微珠加入孔中
• 在 iQue^? 平臺(tái)（采用 BR 和 VBR 配置）上對(duì)樣品板進(jìn)行分析

• 提高準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性
• 實(shí)現(xiàn)高通量分析
• 節(jié)省寶貴的樣品
• 最大程度地提高分析效率

通過(guò)對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)和細(xì)胞活力的多重評(píng)估，確保獲得穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

圖 1.在較寬范圍內(nèi)進(jìn)行可重現(xiàn)和準(zhǔn)確的細(xì)胞活力評(píng)估和細(xì)胞計(jì)數(shù)

(A) 對(duì)各種比率的生長(zhǎng)細(xì)胞與熱滅活細(xì)胞（Jurkat、Raji 或 Ramos 細(xì)胞系）的混合物進(jìn)行測(cè)試，以確保整個(gè)靈敏度范圍內(nèi)的線性相關(guān)性。

(B) 比較不同密度的 Jurkat 細(xì)胞以確定細(xì)胞計(jì)數(shù)的線性范圍?？煽康販y(cè)量密度范圍為 8 × 10⁴ 個(gè)細(xì)胞/mL 至 2 × 10⁷ 個(gè)細(xì)胞/mL 的未稀釋的細(xì)胞。

圖 2.利用熱圖和透視圖得到可操作的數(shù)據(jù)

通過(guò)將有限稀釋的 CHO-S 細(xì)胞接種到 96 孔板中來(lái)進(jìn)行有限稀釋克隆。將細(xì)胞置于定軌搖床上，在 37 ℃ 和 5% 濕度下培養(yǎng)。外孔僅含培養(yǎng)基，以免產(chǎn)生邊緣效應(yīng)。使用 iQue^? 細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力分析試劑盒測(cè)定細(xì)胞密度和細(xì)胞活力。生成 Profile Map，以突出顯示滿(mǎn)足多項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn) [（細(xì)胞密度 > 30 萬(wàn)個(gè)細(xì)胞/mL）且（細(xì)胞活力 > 75%）] 的孔?？赏ㄟ^(guò)拖動(dòng)圖表頂部的滑塊或右鍵單擊編輯來(lái)調(diào)整 Profile Map 中的各項(xiàng)指標(biāo)，“匹配”圖將自動(dòng)更新。匹配結(jié)果可導(dǎo)出為 CSV 文件，用于選擇匹配結(jié)果或其他下游分析。

(A) 細(xì)胞密度熱圖

(B) 細(xì)胞活力熱圖

(C) 顯示與較高密度和活力結(jié)果匹配的 Profile Map

平臺(tái)：與 iQue^? 3/iQue^? Screener Plus - VBR 和 BR 配置兼容