什么是吞噬作用？
吞噬作用是一種特殊形式的內(nèi)吞作用，細胞以這種方式吞噬和內(nèi)化固體物質。巨噬細胞、中性粒細胞和未成熟的樹突狀細胞是免疫系統(tǒng)的主要吞噬細胞，專門參與吞噬過程。吞噬作用是控制、殺傷和處理微生物以進行抗原呈遞的重要機制，代表了病原體先天免疫應答的一個重要方面。
應用
Incucyte? 吞噬作用分析簡介
簡單的即混即讀式成像分析，可直接在培養(yǎng)箱內(nèi)對活細胞的吞噬作用進行實時自動定量分析。該分析采用 pH 敏感性偶聯(lián)探針，可對生物顆粒的內(nèi)化進行實時的可視化和分析，非常適用于監(jiān)測免疫細胞對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌或酵母源性病原體的吞噬作用。
視頻：使用 Incucyte? 活細胞分析系統(tǒng)實時監(jiān)測吞噬作用。使用 Incucyte? 活細胞成像和分析系統(tǒng)采集的延時視頻實時顯示了小鼠 J774A.1 型巨噬細胞吞噬 Incucyte? pHrodo? 綠色大腸桿菌 Bioparticles? 的過程。pHrodo? Bioparticles? 在被吞噬并進入吞噬體的酸性環(huán)境中后，熒光增加。Incucyte? 集成圖像分析工具能夠在整個分析過程中分析和測定綠色熒光信號，并將背景熒光的影響降至最低。注意巨噬細胞的動態(tài)活動，和隨著時間推移形成吞噬杯，進行生物顆粒吞噬的過程。
檢測原理
- 將巨噬細胞（例如 J774A.1 小鼠巨噬細胞）或其他吞噬細胞接種到 96 或 384 孔板中。
- 添加即混即讀的無菌 Incucyte? pHrodo? Bioparticles? 實時監(jiān)測吞噬作用。
- 細胞熒光增加表明 pHrodo? Bioparticles? 已內(nèi)化至吞噬體中。Incucyte? 自動圖像分析可實現(xiàn)對隨時間變化的吞噬作用進行定量分析。
關鍵優(yōu)勢
Incucyte? 吞噬作用分析的關鍵優(yōu)勢
- 使用延時成像技術驗證吞噬作用
- 自動分析和定量
- 即混即讀的 96/384 孔規(guī)格 - 無需執(zhí)行細胞固定、封閉或分離操作
- 高靈敏度、低背景、低細胞數(shù)
- Incucyte? 的無菌 pHrodo? Bioparticles? 可支持長期的實時監(jiān)測（0 到 > 48 小時）
使用延時成像技術驗證吞噬作用
圖 1. J774A.1 小鼠巨噬細胞吞噬 Incucyte? pHrodo? 綠色大腸桿菌 Bioparticles? 的 4 小時延時可視化視頻。圖像中證明了細胞質中存在熒光點狀（吞噬體）標記的結構，但細胞核中不存在該結構。
自動分析和定量
圖 2. 使用熒光分割進行吞噬作用的定量分析。Incucyte? 軟件能夠準確分割熒光圖像（桃紅色 mask），并將背景熒光的影響降至最低。
即混即讀的 96/384 孔規(guī)格 - 無需執(zhí)行細胞固定、封閉或分離操作
圖 3. Incucyte? 吞噬作用分析快速入門指南。
高靈敏度、低背景、低細胞數(shù)
響應程度取決于細胞數(shù)量和 Bioparticles? 數(shù)量。
圖 4. 吞噬作用的定量取決于細胞數(shù)量和 Bioparticles?。J774A.1 小鼠巨噬細胞吞噬 Incucyte? pHrodo? 綠色金黃葡萄球菌 Bioparticles?（96 孔規(guī)格）。注意每孔低至 3 K 細胞時的高信噪比。
圖 5. 在沒有細胞、Bioparticles? 或抑制劑（細胞松弛素 D）的情況下，產(chǎn)生高度一致的吞噬信號，且?guī)缀鯖]有背景信號。圖中顯示了 J774A.1 細胞吞噬 Incucyte? pHrodo? 綠色大腸桿菌 Bioparticles? 的時程孔板視圖。
圖 6.細胞松弛素 D、拉春庫林 A、諾考達唑抑制吞噬作用。圖中顯示了 J774A.1 小鼠巨噬細胞在添加抑制劑的情況下吞噬 Incucyte? pHrodo? 綠色大腸桿菌 Bioparticles? 的結果。
Incucyte? 吞噬作用分析 vs. 其他常見方法
評估吞噬作用的常用方法通常為單點分析（例如高內(nèi)涵分析 (HCA)），需要細胞分離（例如流式細胞儀）或清洗/淬滅標記病原體（例如熒光素標記）。
Incucyte? 活細胞分析 | 酶標儀 | 流式細胞儀? ? | HCA | ELISA | |
|---|---|---|---|---|---|
實時細胞可視化 | ? | ||||
集成分析 | ? | ? | ? | ||
即混即讀，無需清洗或淬滅操作? | ? | ||||
長期動力學測定 | ? | ||||
靈活選擇效應細胞?? | ? | ? | ? | ? | ? |
無需細胞固定/分離 | ? | ? | |||
高靈敏度/低背景信號 | ? | ? | ? | ||
低細胞數(shù)/生物顆粒數(shù)量? ?? | ? | ? | ? |
訂購信息
訂購信息
Incucyte? pHrodo? Bioparticles? 經(jīng)充分驗證，可用于 Incucyte? 活細胞分析系統(tǒng)，并經(jīng)過滅菌處理，可進行吞噬作用的長期監(jiān)測（0 至 >48 小時）。
產(chǎn)品 | 產(chǎn)品數(shù)據(jù)表 | 安全性數(shù)據(jù)表? ? ? | 數(shù)量 | 產(chǎn)品目錄號 |
|---|---|---|---|---|
Incucyte? pHrodo? 紅色大腸桿菌 Bioparticles? | 2 mg | 4615 | ||
Incucyte? pHrodo? 綠色大腸桿菌 Bioparticles? | 查看 | 2 mg | 4616 | |
Incucyte? pHrodo? 紅色酵母聚糖 Bioparticles? | 查看 | 1 mg | 4617 | |
Incucyte? pHrodo? 綠色酵母聚糖 Bioparticles? | 查看 | 1 mg | 4618 | |
Incucyte? pHrodo? 紅色金黃葡萄球菌 Bioparticles? | 查看 | 2 mg | 4619 | |
Incucyte? pHrodo? 綠色金黃葡萄球菌 Bioparticles? | 查看 | 2 mg | 4620 |
資源
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一種用于定量巨噬細胞吞噬作用的全新實時成像平臺
Researchers at The University of Oxford use Incucyte? live-cell analysis system to quantify phagocytosis with?牛津大學的研究人員使用 Incucyte? 活細胞分析系統(tǒng)定量分析吞噬作用，實現(xiàn)了比現(xiàn)有方法更高的準確度和靈敏度。即使細胞數(shù)量稀少或有限，Incucyte? 也能夠支持原代吞噬細胞的詳細體外研究。Kapellos TS, Taylor L, Lee H, Cowley SA, James WS, Iqbal AJ, Greaves DR doi: 10.1016/j.bcp.2016.07.011
