圖 1. 監(jiān)測(cè)腫瘤球大小隨時(shí)間的變化，監(jiān)測(cè)時(shí)，腫瘤球的生長(zhǎng)在組織培養(yǎng)箱內(nèi)不受干擾。

明場(chǎng)圖像顯示了 MDA-MB-231 乳腺癌腫瘤球 ± 細(xì)胞毒素劑喜樹堿 (1 μM) 的生長(zhǎng)情況。 經(jīng)溶媒處理的腫瘤球體積增加，而經(jīng) CMP 處理的腫瘤球保持原有的密度。 每 6 h 自動(dòng)采集一次圖像，用于明場(chǎng)區(qū)域的定量分析。

圖 2. 高質(zhì)量 HD 相位圖和 DF 明場(chǎng)圖像顯示腫瘤球形態(tài)。A549 和 MDA-MB-231 細(xì)胞接種后 72 小時(shí)形成的腫瘤球高質(zhì)量 HD 相位圖和對(duì)應(yīng)的 DF 明場(chǎng)圖像。從圖中可輕松地區(qū)分疏松的聚集體和致密的腫瘤球形態(tài)，如圖中 A549 和 MDA-MB-231 細(xì)胞所示例。MDA-MB-231 聚集物在離心后加入 2.5% v/v Matrigel^?，可密集化形成腫瘤球。所有圖像經(jīng) 10 倍放大后采集。

揭示單一培養(yǎng)或共培養(yǎng)中細(xì)胞隨時(shí)間的變化

圖 3.確定細(xì)胞毒性和細(xì)胞抑制的作用機(jī)制。 利用 Incucyte^? Cytotox 綠色染料比較明場(chǎng)和熒光讀數(shù)。圖像中顯示了處理 10 天后，SK-OV-3 腫瘤球明場(chǎng) mask 區(qū)域中的綠色熒光。 明場(chǎng)區(qū)域的時(shí)程曲線顯示了兩種藥物處理后類似的響應(yīng) - 隨著藥物濃度的增加，腫瘤球的生長(zhǎng)受到抑制。 明場(chǎng)邊界內(nèi)的平均綠色強(qiáng)度（底部行）顯示了腫瘤球?qū)?xì)胞毒性（喜樹堿，左）和細(xì)胞抑制性（環(huán)己酰亞胺）試劑的響應(yīng)差異。 在喜樹堿存在的情況下，細(xì)胞死亡，導(dǎo)致細(xì)胞毒性報(bào)告試劑（Incucyte^? Cytotox 綠色染料）產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度增加；而經(jīng)環(huán)己酰亞胺和溶媒處理的腫瘤球只顯示出少量細(xì)胞死亡，與預(yù)期一致。

圖 4. 在 Incucyte^? 活細(xì)胞分析系統(tǒng)中持續(xù)監(jiān)測(cè)腫瘤球的生長(zhǎng)和細(xì)胞健康狀態(tài)。SK-OV-3 人卵巢癌細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)核限制性熒光蛋白（Incucyte^? Nuclight 紅色慢病毒試劑）。細(xì)胞毒性藥物喜樹堿 (1 μM) 抑制了熒光隨時(shí)間的增加（在明場(chǎng) mask 定義的腫瘤球區(qū)域內(nèi)測(cè)定）。

圖 5.（視頻）.在 3D 細(xì)胞培養(yǎng)模型中定量分析抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性 (ADCC)。在腫瘤球模型中，曲妥珠單抗（Herceptin^?，赫賽汀^?）誘導(dǎo) SK-OV-3 卵巢癌細(xì)胞的免疫細(xì)胞殺傷。將帶有 Incucyte^? Nuclight 紅色標(biāo)記的 HER2 陽(yáng)性 SKOV-3 腫瘤球與 PBMC 共同接種，并使用赫賽汀（靶向 HER2 受體的 mAb）處理。赫賽汀可誘導(dǎo) SKOV-3 腫瘤球的生長(zhǎng)抑制。

下載實(shí)驗(yàn)方案

生成可重現(xiàn)的定量數(shù)據(jù)

圖 6.經(jīng)實(shí)驗(yàn)室測(cè)試和驗(yàn)證的 Incucyte^? 腫瘤球方案清晰易懂。減少 3D 細(xì)胞培養(yǎng)中解決難題的時(shí)間，無(wú)需反復(fù)實(shí)驗(yàn)即可獲得適合定量分析的圖像。

下載實(shí)驗(yàn)方案

圖 7. 腫瘤球培養(yǎng)顯示出分析的穩(wěn)定性和可重現(xiàn)性。Incucyte^? VesselView 展示了 4 個(gè)細(xì)胞密度下 3 種腫瘤球類型（肺癌、纖維肉瘤、卵巢癌）的明場(chǎng)區(qū)域 mask。明場(chǎng)區(qū)域圖顯示，這些細(xì)胞類型以建議的密度（2500 個(gè)細(xì)胞/孔）接種可產(chǎn)生穩(wěn)定的時(shí)程曲線。

圖 8.在生理相關(guān)條件下進(jìn)行穩(wěn)定的藥理學(xué)分析。在組織培養(yǎng)箱中進(jìn)行無(wú)標(biāo)記腫瘤球分析，檢測(cè)喜樹堿 (CMP)、順鉑 (CIS) 和奧沙利鉑 (OXA) 對(duì) SKOV-3 細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。SKOV-3 細(xì)胞以 5000 個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種，等待腫瘤球形成（72 小時(shí)），然后采用一系列稀釋的化合物處理細(xì)胞，獲得腫瘤球生長(zhǎng)的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。微孔板圖表展示了單個(gè)孔隨時(shí)間的最大明場(chǎng) (BF) 面積 (μm2)。濃度響應(yīng)曲線顯示了處理 240小時(shí)后的最大 BF 面積 (μm2)。數(shù)據(jù)收集時(shí)間為 240 小時(shí)，每間隔 6 小時(shí)采集一次圖像。每個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)代表平均值 ± SEM，n = 8。

下載應(yīng)用指南

圖 9. 向?qū)浇缑?，即使初次使用的用戶也能夠輕松操作。 自動(dòng)圖像采集和分析工具可為您帶來(lái)“輕松設(shè)置，自動(dòng)化處理”的體驗(yàn)。支持遠(yuǎn)程查看圖像，監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)程，實(shí)時(shí)分析，快速作出決策。