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循環(huán)腫瘤細(xì)胞分離與分析

在單細(xì)胞水平破譯循環(huán)腫瘤細(xì)胞異質(zhì)性

循環(huán)腫瘤細(xì)胞 (CTCs)是從腫瘤中脫落并進(jìn)入血液循環(huán)的細(xì)胞。這些細(xì)胞在繼發(fā)部位微環(huán)境適應(yīng)和定植后會形成轉(zhuǎn)移灶,導(dǎo)致超過 90% 的腫瘤相關(guān)死亡。通過簡單抽血獲得的 CTC 可以作為“液體活檢”實時監(jiān)測腫瘤特征,包括腫瘤間和腫瘤內(nèi)異質(zhì)性。然而,由于少量 CTC 細(xì)胞和大量白細(xì)胞和紅細(xì)胞的數(shù)量懸殊,CTC 分離和后續(xù)表征在技術(shù)上具有挑戰(zhàn)性。研究人員們已經(jīng)開發(fā)了用于 CTC 檢測、富集和分離的多種分析方法。這些方法都利用了 CTC 特異性特性,如表面標(biāo)志物或例如尺寸、密度或變形性。

賽多利斯為您提供一套獨(dú)特的完整解決方案,用于在富集和染色步驟后,進(jìn)行CTC檢測并分離。您可以將分離細(xì)胞用于 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)組分析。該解決方案以賽多利斯 CellCelector 系統(tǒng)作為CTC檢測儀,配合專門開發(fā)的耗材(例如 CellCelector 納米孔陣列、MagnetPick 載玻片)和經(jīng)驗證的方案。

使用 CellCelector 的單細(xì)胞 CTC 分離和分析工作流程

在典型 CTC 分離和分析工作流程中應(yīng)用 CellCelector。*紅細(xì)胞 (RBC) 裂解是可選的,取決于使用的富集技術(shù);**某些富集技術(shù)允許富集后原位染色;在其他情況下,應(yīng)在從富集裝置中取出樣本后進(jìn)行染色。

與現(xiàn)有富集技術(shù)完全兼容

如許多出版物所述,CellCelector 平臺與多種上游富集技術(shù)兼容:

陽性免疫磁珠富集法(基于EpCAM表面標(biāo)志物等): 例如CellSearch?, Isoflux?, MagSweeper?

基于CD45表面標(biāo)志物的白細(xì)胞(WBC)陰性消除方式:例如Dynabeads?, RosetteSep?

基于微流體或過濾器的非標(biāo)記分離:例如Parsortix?, Clearbridge?, Vortex?, ScreenCell?, RareCells?, Circulogix? etc.

CellCelector 工作流程和耗材可以處理多達(dá)幾十萬個血細(xì)胞的單份樣本,無需減少樣本量。

富集技術(shù)

參考文獻(xiàn)

陽性免疫磁珠

CellSearch??(EpCAM)

Neumann et al., 2016

Isoflux??(EpCAM)

Ma et al., 2016; Cabezas-Camarero et al., 2019; Nimir et al., 2019; Ding et al., 2019

MagSweeper??(EpCAM)

Lohr et al., 2014

Dynabeads 和手持磁珠 (rVAR2)

Agerb?k et al., 2018; Bang-Christensen et al., 2019

CD45 陰性耗竭

Dynabeads??CD45/Dynal? MPC?-S

Blassl et al., 2016

RosetteSep??Human CD45

Yao et al., 2014

基于尺寸的分離

Parsortix?

Lampignano et al., 2017; Szczerba et al., 2019; Gkountela et al., 2019; Reinhardt et al., 2019; Donato et al., 2019

密度梯度離心

OncoQuick?

Heidary et al., 2014

在 CellCelector 單細(xì)胞分離步驟前使用的 CTC 富集技術(shù)和相應(yīng)的已發(fā)表論文(可在“參考文獻(xiàn)”頁面查找參考文獻(xiàn)全文)。

各種癌癥類型的 CTC 分離

癌癥類型

參考文獻(xiàn)

乳腺癌

Heidary et al., 2014; Schneck et al., 2015; Neumann et al., 2016; Lampignano et al., 2017; Szczerba et al., 2019; Gkountela et al., 2019; Reinhardt et al., 2019; Sprouse et al., 2019

前列腺癌

Lohr et al., 2014; Ma et al., 2016; Nimir et al., 2019

結(jié)直腸癌

Adalsteinsson et al., 2013; Cabezas-Camarero et al., 2019

胰腺癌

Kim et al., 2019

卵巢癌

Blassl et al., 2016

肺癌

Yao et al., 2014; Ding et al., 2019

腦癌

Agerb?k et al., 2018; Bang-Christensen et al., 2019

黑色素瘤

Sprouse et al., 2019

CellCelector 技術(shù)能夠從各種癌癥類型的液體活檢樣本中分離得到純的單個腫瘤細(xì)胞。全球已有多家前沿癌癥研究中心使用 CellCelector 系統(tǒng)致力于眾多癌癥實體和應(yīng)用領(lǐng)域的發(fā)展。

使用 CellCelector 平臺分離 CTC 的優(yōu)勢

值得信賴

  • 極低的細(xì)胞損失(無死體積)
  • 單細(xì)胞挑取效率可達(dá)幾乎 100%(取決于工作流程)
  • 自動挑取控制(挑取成功/失敗)

快速

  • 可以在 10 分鐘內(nèi)挑取 20 個單個 CTC,與 RNA 分析和活細(xì)胞挑取兼容
  • 每份樣本的 CTC 計數(shù)和蛋白細(xì)胞分離大約需要 1 小時(使用已富集且已染色的樣本)

易于操作

  • 無需復(fù)雜的樣品制備
  • 功能強(qiáng)大的用戶友好型軟件

功能多樣

  • 分離單個 CTC 和細(xì)胞群
  • 分離固定細(xì)胞和活細(xì)胞
  • 與各種上游富集方法直接兼容
  • 基于細(xì)胞形態(tài)、病理染色和/或多達(dá) 6 個熒光標(biāo)記的自動化 CTC 檢測
  • 自動、半自動或手動細(xì)胞選擇以進(jìn)行挑取
  • 挑取單細(xì)胞或細(xì)胞池
  • 與大多數(shù)實驗室器具兼容:孔板、 培養(yǎng)皿、顯微鏡載玻片、PCR 板/管、納米孔陣列、定制耗材等。

與各種下游分析和培養(yǎng)工作流程完全兼容

  • 與包括 NGS、RNAseq 等在內(nèi)的多種單細(xì)胞分子分析方法兼容。
  • 低量抽吸和分配樣本,與所有單細(xì)胞 WGA 和 qRT-PCR 試劑盒無縫兼容

  • 目的位置溫度受控 (4~37 ℃),有效防止 RNA 降解或促進(jìn)活細(xì)胞存活
  • 以低剪切力進(jìn)行快速挑取,利于活細(xì)胞擴(kuò)增

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