使用 CellCelector 自動分離單個精子細(xì)胞
單個精子細(xì)胞分離對于通過遺傳指紋分析來鑒定家庭關(guān)系問題、在法醫(yī)學(xué)中揭露性犯罪以及完成體外受精過程都至關(guān)重要。
我們將在此處簡單介紹如何使用 CellCelector 全自動無損細(xì)胞分離系統(tǒng)分離單個精子細(xì)胞。
CellCelector將高精度機械挑取手臂與高內(nèi)涵倒置顯微鏡獨特結(jié)合，可以實現(xiàn)自動化細(xì)胞分析，并利用玻璃毛細(xì)管分離單個精子細(xì)胞。您可以通過 CellCelector 系統(tǒng)將耗時的手動操作轉(zhuǎn)換為標(biāo)準(zhǔn)的自動化程序。
使用 20x 物鏡在明場下觀察并分離單個精子細(xì)胞。
使用一些用于在顯微鏡下測量細(xì)胞特性的軟件功能，在約 5 x 33 μm 處測定精子細(xì)胞的大小。
為便于查看，在矩形標(biāo)記區(qū)域中顯示了放大的圖片（右下角）。
單個精子細(xì)胞的檢測
單個精子細(xì)胞的檢測可以在手動模式下通過鼠標(biāo)點擊實時圖像屏幕來完成，也可以在樣本掃描后使用一組經(jīng)過調(diào)整的檢測參數(shù)（直徑、面積、延伸率等）自動進行檢測。
通過定義一系列灰度值可以完成基本檢測。目標(biāo)細(xì)胞可以從鄰近細(xì)胞和背景中分離出來。根據(jù)灰度值閾值的設(shè)置方式，可以檢測完整單個精子或僅檢測精子細(xì)胞的頭部。
建立自動檢測單個人類精子細(xì)胞的參數(shù)。
通過調(diào)整灰度值的范圍（A 和 B），可以根據(jù)參考圖像 (C) 檢測精子的不同部分，檢測區(qū)域用綠色標(biāo)記（D 和 E）。綜合考慮直徑、面積、延伸率 (F) 等附加參數(shù)，可以更好地改善掃描結(jié)果（G 和 H）。
單個精子細(xì)胞的分離
使用內(nèi)徑為 30 μm 的單細(xì)胞挑取用玻璃毛細(xì)管分離單個精子細(xì)胞。通過使用體積為60 nL的液體在細(xì)胞正上方形成抽吸壓力，使細(xì)胞脫離底部，并將其與液體一起吸入玻璃毛細(xì)管中。將分離得到的精子細(xì)胞轉(zhuǎn)移至 2 x 9 孔 Ibidi 載玻片上各個獨立的孔中。自動記錄每個單細(xì)胞分離的挑取前后的圖像，并將這些圖像保存在數(shù)據(jù)庫中。
在分離單個精子細(xì)胞之前（左）和之后（右）拍攝的顯微圖像。