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HSC 子細胞分裂

HSC子細胞分離或“雙細胞分離”

造血干細胞 (HSC) 在造血系統(tǒng)中占據(jù)頂端地位,負責建立和維持功能性血液系統(tǒng)。HSC 憑借其可自我更新以及可生成各種造血系統(tǒng)血細胞的特性發(fā)揮其獨特的作用。因此,自我更新和分化的平衡對于我們血液系統(tǒng)的健康功能而言至關重要。

然而,導致一種或另一種干細胞命運的動力學還尚未明確。CFC實驗是研究命運決策的備選方法之一(請參考?造血干細胞集落)。然而,CFC 試驗只能研究單個干細胞或祖細胞的集落形成,無法區(qū)分這些集落內的單細胞。因此,研究細胞命運決策的另一個選擇是在分子和功能試驗如單細胞測序或移植試驗中,在單細胞水平上研究源于一個“母”HSC 的“子”細胞。

然而,這些方法都需要先分離單個“子”細胞(此處也稱為“Doublets 分裂”)。尤其是對于功能和表達實驗,必須在對細胞分子程序影響盡量小的條件下進行造血干細胞分裂。通常通過 FACS 從骨髓或血液樣本中分離 HSC細胞。然而,由于總體細胞數(shù)量較少(最多 2 個子細胞),無法通過此方法進行 Doublets 分裂。過去,研究人員通過連續(xù)稀釋來進行 Doublets 分裂,即將細胞從一個孔移液到另一個孔,直到得到單個細胞。然而,這種方法并不溫和,損傷風險高,甚至可能導致細胞松散。此外,雙細胞“難分難舍”的特性導致連續(xù)稀釋法的成功率較低。

我們現(xiàn)在為您提供一個更好的選擇,使您能夠溫和地分離子細胞并且確保每個單細胞可追溯。您可以使用 CellCelector 的交互式挑取模式來分裂雙細胞,同時可以通過實時圖像全面掌握細胞行為,避免丟失細胞。而且,CellCelector 挑取細胞的方式非常溫和,最大限度地減少了對細胞分子程序的影響。不僅如此,CellCelector 還可以嚴格記錄挑取流程,確保充分可追溯。

A:來自同一個 HSC 的子細胞,紅色箭頭指向的是待分離的細胞。

B:將毛細管置于待挑取細胞(紅色箭頭)旁邊的位置以分裂雙細胞,盡量遠離其他細胞。

C:在毛細管的吸引力下,細胞現(xiàn)在開始向毛細管方向移動,最接近毛細管的細胞移動最快(紅色箭頭)。

D:一旦細胞無法逃逸,將毛細管移至遠離其他細胞的位置。

E:最終,被吸引的細胞與其他子細胞之間的距離變得足夠大,此時可以安全地進行單細胞挑取。

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