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神經(jīng)元細胞健康與形態(tài)學

神經(jīng)元細胞健康與形態(tài)學概述

表征神經(jīng)突生長、成熟和神經(jīng)突網(wǎng)絡破壞是研究神經(jīng)病理學障礙、神經(jīng)元損傷和再生,以及神經(jīng)毒性篩查的關鍵。此外,細胞活性檢測在候選藥物、培養(yǎng)條件和環(huán)境因素對神經(jīng)元細胞健康和功能影響的研究中起著重要作用。神經(jīng)元細胞健康分析通常用于藥物開發(fā)篩選,也可用于確定具有神經(jīng)保護作用而不造成神經(jīng)毒性的治療方案。

Incucyte? 神經(jīng)元細胞健康與形態(tài)學分析采用全自動圖像采集和分析技術,可顯示細胞在很長一段時間內(nèi)發(fā)生的重大和微小的動態(tài)變化。我們的專用軟件和經(jīng)實驗室測試的無干擾型試劑可與 Incucyte? 活細胞分析系統(tǒng)配合使用,為 96 孔和 384 孔通量的活細胞分析提供了一種新型、有效且完整的解決方案。


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白皮書

借助實時活細胞分析技術揭示神經(jīng)系統(tǒng)疾病和損傷的復雜性

白皮書

神經(jīng)科學家的活細胞分析:iPSCs和原始細胞模型的應用

關鍵優(yōu)勢

  • 獲得動態(tài)信息 - 通過動力學分析獲得每個細胞的更多數(shù)據(jù),且不受終點分析的限制。
  • 保護和保存珍貴細胞 - 使用無標記分析或?qū)槊舾屑毎O計的無干擾熒光試劑,可減少人為干預,保護脆弱的神經(jīng)突。
  • 使用選定的體外模型 - 在單一或共培養(yǎng)環(huán)境中,可與 iPSC 源細胞或原代細胞兼容。
  • 更快獲得答案 - 在藥理學分析的微孔板通量條件下即可輕松生成高度可重現(xiàn)的數(shù)據(jù)。

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獲得動態(tài)信息

使用自動、長期成像和分析捕獲神經(jīng)網(wǎng)絡中顯著和微小的動態(tài)變化,以檢測神經(jīng)突的生長或破壞,以及細胞的健康狀態(tài)。

圖 1.使用生理學相關的體外模型,能更準確地描繪人類神經(jīng)退行性疾病,獲得有價值的生物學啟示。帕金森病 Dopa.4U 細胞模型 (Axol Biosciences) 中 6-羥多巴胺 (6-OHDA) 介導的毒性定量分析。使用 Incucyte? Neurolight 慢病毒感染 Dopa.4U 細胞,然后使用 20 倍物鏡對細胞每 6 小時進行一次成像,連續(xù) 12 天。在 IC50 濃度為 84 μM 的條件下,6-OHDA 可使神經(jīng)突長度呈時間和濃度依賴性下降。

保護和保存珍貴細胞

減少人為干預,保護脆弱的神經(jīng)突。在單一培養(yǎng)中進行無標記神經(jīng)突分析,或在與?Incucyte? Neurolight橙色慢病毒的共培養(yǎng)環(huán)境中進行簡單的無干擾熒光標記。用無干擾、可即混即讀的 Incucyte? Annexin V橙色染料檢測細胞凋亡。無需固定、染色或消化。

圖 2.在 96/384 孔的通量條件下,自動進行神經(jīng)突長度、分支點和細胞體集群的無標記分析。使用 Incucyte? Neurotrack分析軟件模塊可輕松分割大鼠皮層神經(jīng)元的高清相位圖像 (HD),識別神經(jīng)突和細胞體 (A)。PlateGraphs 可顯示每個孔的動態(tài)數(shù)據(jù),迅速可視化和評估 384 孔篩選板的處理趨勢 (B)。

圖 3.在共培養(yǎng)環(huán)境中,使用無干擾型試劑對神經(jīng)突進行長時間的動態(tài)分析。使用 Incucyte? Neurolight 橙色慢病毒感染不同類型的神經(jīng)元細胞,確保神經(jīng)元特異性標記。星形膠質(zhì)細胞存在的情況下培養(yǎng)的大鼠皮層神經(jīng)元在第 10 天用谷氨酸處理,并在 14 天內(nèi)進行轉(zhuǎn)導和成像 (A)。時間進程分析顯示神經(jīng)突長度對谷氨酸處理有濃度依賴性作用 (B)。

圖 4.連續(xù)無創(chuàng)地測量細胞活性的時間進程和濃度依賴性作用。Incucyte? Annexin V 橙色染料不會干擾細胞的健康和形態(tài),還能產(chǎn)生易于測定的熒光信號,可指示細胞凋亡。通過分析整個實驗過程的圖像和視頻中的熒光信號,觀察細胞凋亡動力學 (A)。使用動力學讀數(shù),分析神經(jīng)元培養(yǎng)物濃度依賴性處理的時間進程 (B)。

使用選定的體外模型

在單獨培養(yǎng)或共培養(yǎng)環(huán)境中,用于神經(jīng)突分析和細胞健康實驗的Incucyte??試劑與 iPSC 源細胞或原代細胞兼容。

圖 5.在您首選的原代或 iPSC 源神經(jīng)細胞類型中檢查神經(jīng)退行性疾病的讀數(shù)。Incucyte? Neurolight橙色慢病毒試劑可在共培養(yǎng)環(huán)境中選擇性標記神經(jīng)突,用于分析神經(jīng)突的長度。本例中檢測了 Dopa.4U、 hNPC、 iCell 和 Peri.4U 細胞。

更快獲得答案

使用適合藥理學分析的數(shù)據(jù)支持藥物的開發(fā)研究。使用易于生成、高度可重現(xiàn)的高通量數(shù)據(jù)評估多種實驗條件。采用我們的完整解決方案(包括實驗室測試試劑、活細胞方案和專用軟件工具),雖然花費了更多的檢測時間,但同時減少了更多排除問題的時間。

圖 6.在 6 × 96 或 6 × 384 孔板中平行使用盡可能少的細胞,通過連續(xù)自動圖像采集快速生成一致、大批量的數(shù)據(jù)集。iCell 神經(jīng)元神經(jīng)突長度的時間進程曲線顯示,在 384 孔板中培養(yǎng) 11 天的方案重現(xiàn)性很高 - CV < 15% (A)。384 孔板顯示出藥理學可重現(xiàn)性,可輕松生成 EC/IC50 曲線 (B)。

分析

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Incucyte?神經(jīng)突生長分析

關鍵優(yōu)勢:

  • 使用Incucyte? Neurotrack分析軟件模塊生成動力學的、基于圖像的和自動的測量結(jié)果
  • 終點分析往往會遺漏細微、短暫的事件 -?Incucyte? 能無創(chuàng)、重復地對相同的神經(jīng)網(wǎng)絡進行測量
  • 使用簡單、僅需少量細胞的方案生成更多信息豐富的數(shù)據(jù) - 無需細胞分離或固定/染色


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Incucyte? Annexin V橙色染料用于細胞凋亡分析

關鍵優(yōu)勢:

  • 適用于藥理學研究的實時、自動化凋亡時間進程分析
  • 通過圖像和視頻觀察形態(tài)學變化,驗證處理效果
  • 使用無干擾的即混即讀試劑,可保持細胞健康和形態(tài),同時減少珍貴細胞的損失


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儀器

Incucyte? SX5 活細胞分析系統(tǒng)

我們?nèi)碌母叨水a(chǎn)品,可支持更多應用,擁有多達 5 個熒光通道

4816

神經(jīng)突動力學分析

Incucyte? NeuroTrack 分析軟件模塊

能夠標記或非標記的分析神經(jīng)突動力學

9600-0010

Incucyte? NeuroLight橙色慢病毒

可長期表達橙色熒光蛋白的活細胞神經(jīng)元標記試劑

4808

Incucyte? NeuroLight紅色慢病毒

可長期表達紅色熒光蛋白的活細胞神經(jīng)元標記試劑

4807

Incucyte? NeuroPrime橙色試劑盒

試劑盒中包含:

  • Incucyte? NeuroLight橙色慢病毒試劑

  • Incucyte? 大鼠星形膠質(zhì)細胞

  • Incucyte? 大鼠神經(jīng)元

4760

Incucyte? NeuroPrime紅色試劑盒

試劑盒中包含:

  • Incucyte? NeuroLight紅色慢病毒試劑

  • Incucyte? 大鼠星形膠質(zhì)細胞
  • Incucyte? 大鼠神經(jīng)元

4585

神經(jīng)元細胞健康

Incucyte? Annexin V綠色染料

單支凍干試劑,在96孔板中可進行100-200 tests的活細胞凋亡實驗

4642

Incucyte? Annexin V橙色染料

單支凍干試劑,在96孔板中可進行100-200 tests的活細胞凋亡實驗

4759

Incucyte? Annexin V紅色染料

單支凍干試劑,在96孔板中可進行100-200 tests的活細胞凋亡實驗

4641

Incucyte? Annexin V NIR染料

單支凍干試劑,在96孔板中可進行100-200 tests的活細胞凋亡實驗

4768

細胞系

Incucyte? 大鼠神經(jīng)元

單支冷凍保存的大鼠皮層神經(jīng)元,密度為 2 × 106 個/瓶

4753

Incucyte? 大鼠星形膠質(zhì)細胞

單支冷凍保存的大鼠星形膠質(zhì)細胞,密度為 2 × 106 個/瓶?

4586


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