疏水層析(HIC)
當(dāng)今的生物工藝需要更精確和更有效的操作。疏水層析 (HIC) 根據(jù)分子表面疏水性來分離分子。這項(xiàng)技術(shù)被廣泛應(yīng)用于色譜純化,與其他方法如離子交換(IEX)或親和相比,是一個(gè)更精確的純化步驟。HIC通常需要高鹽濃度,以便有效結(jié)合靶蛋白。因此,最好是在層析步驟后使用,在層析步驟(如離子交換層析)中用高鹽濃度可完成洗脫。
賽多利斯擁有一系列HIC模式(樹脂、膜和整體柱)來匹配您的應(yīng)用。
為您的疏水層析工藝尋求合適的解決方案
HIC主要用于聚集體去除,因?yàn)樗谠摴δ芊矫婢哂袃?yōu)越的性能。
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樹脂對中小型蛋白質(zhì)具有良好的結(jié)合能力,而混合型樹脂通常結(jié)合了HIC和IEX的作用機(jī)制。
與樹脂相比,膜對病毒、病毒樣顆粒和其他大型復(fù)合物具有更高的結(jié)合能力,并且還具有更高流速的優(yōu)勢,從而可以縮短工藝時(shí)間并提高生產(chǎn)率。
HIC整體柱是分離質(zhì)粒DNA亞型的關(guān)鍵。
HIC中的Sartobind? 膜
Sartobind? 苯基-易于去除骨料
Sartobind? 苯基是一種低配體取代的疏水性相互作用膜。這使得可以采用溫和的洗脫條件純化所有生物分子。?
Sartobind??苯基膜可被視為精制(流通)操作和許多結(jié)合和洗脫應(yīng)用的色譜柱的替代物,因?yàn)樗鼈冊诩兓笊锓肿訒r(shí)可以在更高流速下工作,降低復(fù)雜性,并且沒有尺寸排斥效應(yīng)。
突破10%時(shí)的典型動(dòng)態(tài)結(jié)合能力(DBC)為:
??? ?9-13 mg/mL mAb
??? ?10 mg/mL BSA
??? ?23 mg/mL溶菌酶
用于HIC的整體柱
疏水層析(HIC)的選擇
疏水層析(HIC)是核酸分離的必要手段。當(dāng)與整體柱層析的優(yōu)點(diǎn)相結(jié)合時(shí),HIC滿足了這一需要,同時(shí)也為包括腺相關(guān)病毒(AAV)在內(nèi)的大生物分子的純化提供了極好的解決方案。
流道尺寸 | 1.3, 2, 6 μm | 2, 6 μm |
柱體積 | 1 mL – 8 L | 1 mL – 8 L |
檢測范圍,pH? | 2 – 10 | 2 – 10 |
功能 | 弱疏水性 | 強(qiáng)疏水性 |
典型應(yīng)用 | 病毒,(如AAV)和VLP | 核酸(pDNA、mRNA)? |
CIMmultus??OH – 疏水層析
不帶電的(中性)配體
檢測范圍,pH 2-10
在鹽沉淀或聚乙二醇存在下可保留非常大的溶質(zhì)(病毒顆粒、VLP、囊泡)
按尺寸遞增順序洗脫大溶質(zhì),分離率高
用鹽沉降或聚乙二醇洗脫
可用1 M NaOH進(jìn)行消毒