小膠質(zhì)細(xì)胞的表征
神經(jīng)免疫學(xué)是一門(mén)研究發(fā)育期間、體內(nèi)穩(wěn)態(tài)和損傷或感染反應(yīng)期間神經(jīng)和免疫系統(tǒng)相互作用的學(xué)科。免疫細(xì)胞在神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)的調(diào)節(jié)中具有至關(guān)重要的意義，例如小膠質(zhì)細(xì)胞的突觸修剪是神經(jīng)可塑性的重要組成部分。損傷、感染或內(nèi)穩(wěn)態(tài)失衡可導(dǎo)致神經(jīng)炎癥和小膠質(zhì)細(xì)胞活化，進(jìn)而吞噬死亡或正在死亡的神經(jīng)元和感染因子。慢性神經(jīng)炎癥被認(rèn)為是許多神經(jīng)退行性疾病（如阿爾茲海默癥）的誘因，因此小膠質(zhì)細(xì)胞的長(zhǎng)期活化會(huì)危及神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)。
Incucyte? 活細(xì)胞分析系統(tǒng)能對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行各類形態(tài)學(xué)和功能表征。其全自動(dòng)化圖像采集和分析有助于對(duì)凋亡神經(jīng)元的小膠質(zhì)細(xì)胞胞葬作用或生物顆粒吞噬作用進(jìn)行可視化和動(dòng)力學(xué)分析。小膠質(zhì)細(xì)胞在趨化細(xì)胞因子作用下的遷移可以通過(guò)活細(xì)胞趨化遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)進(jìn)行可視化和量化。無(wú)干擾型試劑可以維持細(xì)胞形態(tài)不受終點(diǎn)分析的干擾和限制，因而能直接以 96 和 384 孔的通量從培養(yǎng)箱中不間斷培養(yǎng)的每個(gè)細(xì)胞中收集更多數(shù)據(jù)。
介紹神經(jīng)免疫功能的Incucyte?分析方法
Incucyte??吞噬實(shí)驗(yàn)
- 生成被吞噬細(xì)胞的定量、可重復(fù)和特異性的測(cè)量數(shù)據(jù)
- 通過(guò)圖像和視頻觀察和驗(yàn)證吞噬細(xì)胞對(duì)細(xì)胞碎片和死亡神經(jīng)元的動(dòng)態(tài)清除
使用 Incucyte? pHrodo? 橙色細(xì)胞標(biāo)記試劑盒對(duì)目標(biāo)進(jìn)行無(wú)干擾型標(biāo)記
- 使用您選擇的微孔板形式的模型高效地研究整個(gè)吞噬過(guò)程
Incucyte??趨化實(shí)驗(yàn)
- 將實(shí)時(shí)趨化性測(cè)量與形態(tài)的視覺(jué)評(píng)價(jià)聯(lián)系起來(lái)，可更深入地研究細(xì)胞表型
- 僅需使用少量細(xì)胞在 96 孔板中分析敏感和罕見(jiàn)的細(xì)胞，重現(xiàn)性高
- 無(wú)需固定、染色或細(xì)胞刮拭步驟，即可測(cè)量無(wú)標(biāo)記或有標(biāo)記的細(xì)胞遷移
- 一站式解決方案，包括專用軟件和新型光學(xué)透明?Incucyte? ClearView 板
關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)
觀察并驗(yàn)證小膠質(zhì)細(xì)胞的吞噬
- 通過(guò)用 pH 敏感的熒光探針獲取的圖像和視頻觀察小膠質(zhì)細(xì)胞的吞噬情況。
- 該方法適用于凋亡細(xì)胞、細(xì)胞碎片、蛋白質(zhì)聚集體和生物顆粒的吞噬作用。
圖 1.觀察并驗(yàn)證小膠質(zhì)細(xì)胞的吞噬。iPSC 源小膠質(zhì)細(xì)胞 (Axol BioSciences) 吞噬 pHrodo 橙色標(biāo)記的凋亡 Neuro2A 細(xì)胞的延時(shí)可視化。 圖像驗(yàn)證了凋亡的靶細(xì)胞進(jìn)入小膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)的過(guò)程。 Neuro2A 靶細(xì)胞用?Incucyte??pHrodo 橙色細(xì)胞標(biāo)記試劑盒標(biāo)記，并用十字孢堿誘導(dǎo)凋亡。
對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞吞噬和胞葬作用進(jìn)行實(shí)時(shí)量化
自動(dòng)分離由 Incucyte? pHrodo? 橙色試劑發(fā)出的熒光信號(hào)
結(jié)合?Incucyte? pHrodo 橙色細(xì)胞標(biāo)記試劑盒，實(shí)時(shí)分析凋亡的 Neuro2A 細(xì)胞或 β 淀粉樣蛋白聚合體的吞噬反應(yīng)
評(píng)估吞噬調(diào)節(jié)劑的作用機(jī)制
圖 2.對(duì)小膠質(zhì)細(xì)胞吞噬作用進(jìn)行實(shí)時(shí)量化。iPSC 源小膠質(zhì)細(xì)胞 (Axol Bioscience) 吞噬 pHrodo 標(biāo)記的凋亡神經(jīng)元 (Neuro-2A) 的代表性熒光圖像。當(dāng)靶細(xì)胞內(nèi)化為酸性吞噬體時(shí)，觀察到細(xì)胞內(nèi)橙色熒光增加；青色輪廓為分光遮片。pHrodo 標(biāo)記的 Neuro2A 細(xì)胞的胞葬作用依賴于細(xì)胞數(shù)量。pHrodo 標(biāo)記的 Aβ 聚集體的吞噬作用依賴于時(shí)間和濃度。
圖 3.吞噬調(diào)節(jié)機(jī)制的評(píng)價(jià)。BV-2 效應(yīng)細(xì)胞胞葬凋亡的 Neuro2A 細(xì)胞（左圖）或大腸桿菌生物顆粒（中間圖）。細(xì)胞松弛素 D（上圖）對(duì)胞葬作用和吞噬作用均有濃度依賴性抑制作用， IC50 值分別為 0.16 μM 和 1.5 μM。相比之下，西侖吉肽（一種 aVb3 和 aVb5 整合素的抑制劑）選擇性地減弱了胞葬作用（IC50 值為 0.17 μM），且在實(shí)驗(yàn)的最高濃度 (100 μM) 下對(duì)吞噬作用幾乎或沒(méi)有影響。這些數(shù)據(jù)支持了整合素在胞葬作用所需的細(xì)胞相互作用中發(fā)揮其功能，而不是細(xì)菌的吞噬作用。
評(píng)估小膠質(zhì)細(xì)胞的趨化性和遷移
用圖像和視頻觀察小膠質(zhì)細(xì)胞的趨化性
每個(gè) 96 孔趨化板僅需 1,000 至 5,000 個(gè)細(xì)胞，適用于數(shù)量少且昂貴的原代細(xì)胞群
圖 4.評(píng)估小膠質(zhì)細(xì)胞的趨化性和遷移。Incucyte??ClearView 板上 iPSC 源小膠質(zhì)細(xì)胞 (CDI) 的圖像?？紫度缢{(lán)圈所示（左圖）。小膠質(zhì)細(xì)胞向補(bǔ)體成分 5a (C5a) 的遷移有時(shí)間和濃度依賴性。
監(jiān)測(cè)分化或活化后的形態(tài)變化
追蹤單核細(xì)胞向小膠質(zhì)細(xì)胞分化過(guò)程中的形態(tài)變化
圖 5.iPSC 源單核細(xì)胞 (Axol BioScience) 分化為小膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化展示。注意小膠質(zhì)細(xì)胞的外觀變化。 12 天后，紅色箭頭所示為分支狀細(xì)胞，而黃色箭頭所示為較大的扁平變形蟲(chóng)樣細(xì)胞。14 天內(nèi)每隔 2 天給予細(xì)胞分化培養(yǎng)基，每 6 小時(shí)采集 20 倍放大的時(shí)相圖。
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應(yīng)用 | 說(shuō)明 | 商品目錄號(hào) |
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吞噬作用 | ||
Incucyte? pHrodo? 橙色細(xì)胞標(biāo)記試劑盒，適用于吞噬作用 | 1 盒 | 4766 |
Incucyte? pHordo? 紅色細(xì)胞標(biāo)記試劑盒 | 1 盒 | 4649 |
趨化作用 | ||
Incucyte? 趨化分析軟件模塊 | 1 個(gè)模塊 | 9600-0015 |
Incucyte? ClearView 96孔趨化板 | 1 塊板 | 4582 |
Incucyte? ClearView 96孔趨化板 – 10 塊裝 | 10 塊板 | 4648 |
所有應(yīng)用 | ||
Incucyte? SX5 活細(xì)胞分析系統(tǒng) 包括圖像采集與分析系統(tǒng)：
| 1 套系統(tǒng) | 4816 |
